GIEMSA (Solución) Biopack

Reactivo de Diagnostico de Uso in Vitro                                                         

Cat. Nº 2000110000

Uso Previsto:

Giemsa Solución se utiliza para diagnóstico e investigación de muestras clínico-hematológicas de la medicina humana y veterinaria.

Es una solución de aplicación combinada con otros productos de diagnóstico in vitro de nuestra línea Biopack. Su uso junto al May Grünwald (Solución) Cod. 2000110400 permite diferenciar, calificar y cuantificar los principales elementos formes de la sangre, además de la detección de parásitos. Esta técnica de tinción permite demostrar la morfología de las células, la proporción de los elementos sanguíneos y posibles alteraciones de cantidades de dichos elementos

Principio:

Cuando los frotis de sangre se tiñen con la tinción de Giemsa, el núcleo y el citoplasma de los glóbulos blancos adquieren coloración azul o rosa característica. El uso de tintes de eosina y tiazina purificados otorga estabilidad tintorial a la solución.

Giemsa Solución se utiliza con frecuencia con fines diagnóstico en las áreas de hematología e histología.

Pertenece al grupo de tinciones conocidas como Tinciones Romanowsky.

Para su uso en el área de la hematología, Giemsa de utiliza junto a May Grünwald según el procedimiento de tinción de Pappenheim, May Grunwald – Giemsa.

La solución de May-Grünwald, contiene el colorante aniónico Eosina y el colorante catiónico Azul de Metileno ambos disueltos en metanol. Su función es tintorial y de fijación.

La solución de Giemsa, contiene Eosina, Azul de Metileno y una serie de productos de la oxidación de este último tales como el Azur A, el Azur B, el Violeta de metilo y el Azul de Metilo.

Todos estos colorantes se encuentran en solución de alcohol metílico, y al añadir agua en la preparación se ionizan y se unen químicamente a los diferentes componentes de las células, formando un precipitado de sales.

Los componentes celulares aniónicos – ácidos se unen selectivamente a los colorantes catiónicos tiñéndose en tonos de azul. Estos componentes son llamados basófilos: (ADN, mitocondrias, ribosomas y citoplasma de células ricas en ARN).

Los componentes celulares catiónicos - básicos se unen selectivamente a los colorantes ácidos  (eosina) tiñéndose de tonos naranja y rojo. A estos elementos se los denomina acidófilos o eosinófilos. Este es el caso de la hemoglobina, y de las proteínas contenidas en los granulocitos eosinófilos.

Los componentes celulares que tienen afinidad por ambos tipos de colorantes se denominan neutrófilos y se tiñen en variados tonos de violeta.

Procedencia de las muestras:

•           Frotis de sangre o de médula ósea.

•           Material citológico obtenido por punciones con aguja fina.

•           Cortes histológicos de muestras de tejido fijados  y embebidos en parafina.

Preparación de las muestras:

•           La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado.

•           Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.

Frotis Sanguíneos:

•           Para lograr una satisfactoria preparación citológica es necesario que la toma o recolección del material sea adecuada.

•           De ser un frotis o extendido celular, una vez realizado dejar secar al aires unos minutos. El mismo no debe tener conglomerados celulares (superposición celular). Esto dificulta la fijación, la correcta tinción y la posterior visualización al microscopio.

Corte Histológico:

•           En el caso de Medulas Oseas utilizar Histodecal Extra (Cod. 2000942100) a base de EDTA y libre de ácidos, para una descalcificación con preservación de determinantes antigénicos.

•           Previo a la tinción, desparafinar con Xilol o Bioclear (Aclarante uso Histológico Cod. 2000942700), hidratar con Alcoholes decrecientes o Deshidratante 100° Uso Histológico (Cod. 2000948300) y Deshidratante 90° Uso Histológico (Cod. 2000938300).

Preparación de los reactivos:

Giemsa  (Solución) Cod. 2000110000, es una solución concentrada. Según protocolo podrá ser diluida en el momento de aplicación.

Procedimiento de tinción MAY GRUNGWALD – GIEMSA (según Pappenheim) para HEMATOLOGIA. Tinción de Frotis Sanguíneos y Cortes histológicos. Método manual

Consideraciones previas:

•           La inmersión de los extendidos debe ser completa.

•           La inmersión incompleta de las muestras proporcionará resultados de tinción insuficientes.

•           Los portaobjetos deberán ser escurridos después de los diferentes pasos del procedimiento de tinción para minimizar el arrastre de soluciones.

Reactivos Auxiliares

•           May Grunwald (Solución)  Cod. 2000110400

•           Agua Purificada  (Cod. 2000140100)

•           Solución Buffer pH 7 (Cod. 2000088500)

•           Aceite de Inmersión (Cod. 2000130600)

•           Histodecal Extra (Cod. 2000942100)

•           Bioclear® (Aclarante uso Histológico) (Cod. 2000942700)

•           Alcohol Etílico absoluto p.a. (Cod. 2000165400)

•           Alcohol Etílico 96º p.a. (Cod. 2000937500)

•           Deshidratante 100° Uso Histológico (Cod. 2000948300)

•           Deshidratante 90° Uso Histológico (Cod. 2000938300)

•           Bálsamo de Canadá Sintético (Cod. 2000130300)

Procedimiento:

•           Para frotis sanguíneo o extendido citológico

•           Para cortes histológicos de Medula Ósea, desparafinados e hidratados