OG 6 según PAPANICOLAOU (Solución)

 

Cat. Nro. 2000110200          

Reactivo de Diagnostico para Uso in Vitro

 

Uso Previsto:

OG 6 según Papanicolaou es una solución colorante que se utiliza para el diagnóstico celular, mediante la exanimación al microscopio de extendidos citológicos.

Esta solución colorante OG 6 junto al EA 36 / EA 50 y la Hematoxilina de Harris son reactivos integrantes de la técnica de Tinción según PAPANICOLAOU. Dicha técnica es el método por excelencia para el diagnóstico de muestras citológicas, cérvico vaginales, líquidos o fluidos obtenidos por punción, y de exudados y secreciones corporales en la medicina humana.

 

Principio:

OG 6 es una solución alcohólica acidificada del colorante biológico conocido como Naranja G.

El medio alcohólico de ésta solución aporta una coloración citoplasmática fina y transparente característica de la tinción de Papanicolaou.

Ésta solución colorante monocromática es la responsable de aportar diferencialmente las tonalidades rojas y anaranjadas a las proteínas del citoplasma, tiñe el citoplasma del epitelio escamoso simple, maduro y queratinizado.

Además colorea eritrocitos, cristales de hemosiderina, cuerpos de asbesto.

 

Procedencia de las muestras:

Extendidos citológicos de muestras ginecológicas y no ginecológicas como esputos, orina, frotis tomados de punciones aspirativas con aguja fina (PAAF), soluciones de lavado, exudados y secreciones corporales.

 

Reactivos y presentación:

OG 6 según Papanicolaou Solución (Cod. 2000110200)

Envase 500 mL (Cod. 2000110207)

Envase 1000 mL (Cod. 2000110208)

 

Reactivos necesarios no provistos para Tinción de Papanicolaou:

•           Fijador Citológico Pathofix (Cod. 2000953000)

•           Fijador de Saccomano (Cod. 2000958800)

Tinción Nuclear:

•           Hematoxilina de Harris (Solución) Cod.2000083200

•           Hematoxilina s/Gill II (Solución) Cod. 2000949100

Tinción diferenciada:

•           EA 36  s/Papanicolaou (Solución); Cod. 2000110300

•           EA 50 s/Papanicolaou (Solución); Cod. 2000110700

•           Bálsamo de Canadá Sintético Cod. 2000130300

 

Preparación de las muestras:

La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado.

Para lograr una satisfactoria preparación citológica es necesario que la toma o recolección del material sea adecuada. De ser un frotis o extendido celular, que el mismo no cuente con grandes conglomerados celulares (superposición celular). Esto dificulta la fijación, la correcta tinción y la posterior visualización al microscopio.

Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.

 

Fijación:

1.  Citología ginecológica: realizar la fijación de la muestra inmediatamente después de realizado el extendido sumergiendo en Alcohol Etílico 96° o rociando con Fijador Citológico Pathofix (Cod. 2000953000) Continuar con procedimiento de tinción.

2.  Citología oncológica y / no ginecológica: Agregar solución de Fijador de Saccomano (Cod. 2000958800) a igual volumen de muestra, homogenizar y dejar fijar durante 60 minutos. Centrifugar, realizar extendidos citológicos y dejar secar para lograr mayor adhesión de la muestra. Continuar con procedimiento de tinción.

 

Preparación de los reactivos:

OG 6 según PAPANICOLAOU (Solución) es un reactivo listo para usar.

La dilución de este reactivo puede variar los resultados y estabilidad esperados del producto.

 

Procedimiento de tinción - Técnica de Papanicolaou:

En cubeta de tinción, método manual

Consideraciones previas:

•           La inmersión de los extendidos debe ser completa.

•           La inmersión incompleta de las muestras proporcionará resultados de tinción insuficientes.

•           Los portaobjetos deberán ser escurridos después de los diferentes pasos del procedimiento de tinción para minimizar el arrastre de soluciones.

 

Portaobjetos con extendido / frotis / impronta fijados

Paso        Método / Reactivo                                  Técnica / Tiempo

1              Sumergir en Alcohol 96°                         5 minutos

2              Lavar en agua destilada                          Varias inmersiones, hasta completa hidratación

3              Teñir con Hematoxilina de Harris // Gill II  40 segundos / 2 minutos (*1)

4              Virar en agua corriente                            5 minutos

5              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

6              Teñir con OG 6                                      1 /3  minutos (*1)

7              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

8              Teñir con EA 36 / EA 50                         40 segundos / 2 minutos (*1)

9              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

10            Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

11            Sumergir en Alcohol 100°                       Varias inmersiones / 5 segundos

12            Sumergir en Xilol / Bioclear (*2)               Varias inmersiones / 5 segundos

13            Sumergir en Xilol / Bioclear (*2)               Varias inmersiones / 5 segundos

14            Montar con Bálsamo de Canadá Sintético (Cod. 2000130300) y cubreobjetos. En el caso de aclarar con Bioclear (Cod. 2000942700) (*1), se recomienda eliminar el exceso de aclarante, para que el bálsamo se disperse y cubra por completo la muestra al colocar el cubreobjeto.

15            Observar al microscopio.

 

(*1) – Los tiempos de tinción con Hematoxilina Harris o Gill II podrán ser modificados y ajustados por el operador, teniendo en cuenta la intensidad de tinción deseada.

(*2) - Bioclear (Cod. 2000942700) es el aclarante uso histológico, sustituto del Xilol, válido para procesamiento histológico de muestras y montaje final con Bálsamo de Canadá sintético y cubreobjetos

 

Resultados:

Núcleos celulares                                 Azul grisáceo

Células superficiales                            Rosa

Células Acidófilas                                 Rojo         

Células Intermedias y parabasales:     Azul

Células basófilas:                                 Verde azulado          

Eosinófilos:                                           Rojo-Naranja       

Eritrocitos:                                            Rojo-Naranja       

Cándidas:                                             Rojo

Citoplasma queratinizado:                   Rosa - Naranja

Trichomonas:                                       Verde grisáceo

 

Notas técnicas:

·                Para el análisis de preparados con aumento microscópico mayor a 40x se recomienda el uso de aceite de inmersión.

·               

Servicio Técnico:

Nuestro equipo de cientificos tiene experiencia en todas las areas de investigación.

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