EA 50 según PAPANICOLAOU (Solución)

Cat. Nro. 2000110700          

Reactivo de Diagnostico para Uso in Vitro

Uso Previsto:

EA 50 según Papanicolaou es una solución colorante que se utiliza para el diagnóstico celular, mediante la exanimación al microscopio de extendidos citológicos.

Esta solución colorante EA 50 junto al OG 6 y la Hematoxilina de Harris / Gill II son reactivos integrantes de la técnica de Tinción según PAPANICOLAOU. Dicha técnica es el método por excelencia para el diagnóstico de muestras citológicas, cérvico vaginales, líquidos o fluidos obtenidos por punción, y de exudados y secreciones corporales en la medicina humana.

Principio:

EA 50 según Papanicolaou es una solución colorante alcohólica acidificada de diversos colorantes biológicos como son el Verde Luz y la Eosina amarillenta.

El medio alcohólico de ésta solución aporta una coloración citoplasmática fina y transparente característica de la tinción de Papanicolaou.

La solución colorante policroma EA 50 es la que aporta diferenciación al epitelio escamoso simple, en tonalidades azules y verdes.

Tanto EA 36 como EA 50 contienen los mismos colorantes biológicos, y se clasifican según sea la concentración de de Verde Luz en su formulación.

Procedencia de las muestras:

Extendidos citológicos de muestras ginecológicas y no ginecológicas como esputos, orina, frotis tomados de punciones aspirativas con aguja fina (PAAF), soluciones de lavado, exudados y secreciones corporales.

Reactivos y presentación:

EA 50 según Papanicolaou Solución (Cod. 2000110700)

Envase 500 mL (Cod. 2000110707)

Envase 1000 mL (Cod. 2000110708)

Reactivos necesarios no provistos para Tinción de Papanicolaou:

•              Fijador Citológico Pathofix (Cod. 2000953000)

•              Fijador de Saccomano (Cod. 2000958800)

Tinción Nuclear:

•              Hematoxilina de Harris Solución (Cod.2000083200)

•              Hematoxilina según Gill II Solución (Cod. 2000949100)

Tinción diferenciada:

•              OG 6  según Papanicolaou Solución (Cod. 2000110200)

•              Balsamo de Canadá Sintético (Cod. 2000130300)

Preparación de las muestras:

La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado.

Para lograr una satisfactoria preparación citológica es necesario que la toma o recolección del material sea adecuada. De ser un frotis o extendido celular, que el mismo no cuente con grandes conglomerados celulares (superposición celular). Esto dificulta la fijación, la correcta tinción y la posterior visualización al microscopio.

Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.

Fijación:

1.  Citología ginecológica: realizar la fijación de la muestra inmediatamente después de realizado el extendido sumergiendo en Alcohol Etílico 96° o rociando con Fijador Citológico Pathofix (Cod. 2000953000) Continuar con procedimiento de tinción.

2.  Citología oncológica y / no ginecológica: Agregar solución de Fijador de Saccomano (Cod. 2000958800) a igual volumen de muestra, homogenizar y dejar fijar durante 60 minutos. Centrifugar, realizar extendidos citológicos y dejar secar para lograr mayor adhesión de la muestra. Continuar con procedimiento de tinción.

Preparación de los reactivos:

EA 50 según PAPANICOLAOU (Solución) es un reactivo listo para usar.

La dilución de este reactivo puede variar los resultados y estabilidad esperados del producto.

Procedimiento de tinción - Técnica de Papanicolaou:

En cubeta de tinción, método manual

Consideraciones previas:

•              La inmersión de los extendidos debe ser completa.

•              La inmersión incompleta de las muestras proporcionará resultados de tinción insuficientes.

•              Los portaobjetos deberán ser escurridos después de los diferentes pasos del procedimiento de tinción para minimizar el arrastre de soluciones.

Portaobjetos con extendido / frotis / impronta fijados

Paso        Método / Reactivo                                  Técnica / Tiempo

1              Sumergir en Alcohol 96°                         5 minutos

2              Lavar en agua destilada                          Varias inmersiones, hasta completa hidratación

3              Teñir con Hematoxilina de Harris // Gill II  40 segundos / 2 minutos (*1)

4              Virar en agua corriente                            5 minutos

5              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

6              Teñir con OG 6                                      1 /3  minutos (*1)

7              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

8              Teñir con EA 36 / EA 50                         40 segundos / 2 minutos (*1)

9              Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

10            Sumergir en Alcohol 96°                         Varias inmersiones / 5 segundos

11            Sumergir en Alcohol 100°