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2000170700 TINCIÓN DE PAS
ESPECIFICACIONES TÉCNICAS
Análisis Especificación
Aptitud para tinción Cumple
MODO DE USO

TINCIÓN DE PAS

Kit de Tinción para microscopia

 

Reactivo de Diagnostico de Uso in Vitro    

Cat. Nº 2000170700

 

Uso Previsto:

La Tinción de PAS  es un procedimiento aplicable a cortes o secciones de tejidos parafinados, frotis de sangre, improntas de tejidos o extendidos citológicos, para la determinación de glucógeno, mucinas, mucopolisacáridos, hidratos de carbono y linfocitos, mediante una reacción cromática.

La aplicación de esta técnica de tinción es parte fundamental de paneles de tinciones histoquímicas tanto dentro del área diagnostica de histopatologías humanas, animales como en el campo de la investigación.

Dentro de las patologías más comunes de aplicación podemos nombrar: leucemia linfocítica, patologías hepáticas, renales, musculares y de piel.

Mediante la Tinción de PAS también es posible la demostración de microorganismos fúngicos en cortes o secciones de tejidos parafinados.

 

Principio:

El mecanismo de acción del Reactivo según Schiff consiste en una previa oxidación de los glicoles presentes en la  muestra tratada mediante la aplicación del Acido Periódico (Solución A). Luego estos componentes reaccionan con la fucsina básica del Reactivo según Schiff (Solución B), tiñéndolos de un color rojo magenta.

Mediante una digestión previa opcional con diastasa (α-amilasa) puede utilizarse para el diagnóstico de enfermedades relacionadas con el almacenamiento de glicógeno.

 

Procedencia de las muestras:

Tinción de PAS se aplica frecuentemente en cortes histológicos de muestras de tejidos fijados, procesados e incluidos en parafina.

Puede emplearse también sobre extendidos citológicos, frotis de sangre o médula ósea o material clínico citológico como sedimentos urinarios, esputos, frotis tomados de punciones aspirativas (Paaf), líquidos de lavados e improntas de tejidos.

 

Recolección de muestras:

Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorios.

Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.

Los manuales de procedimientos de histología estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección de muestras y el almacenaje de las mismas.

 

Contenido del Kit:

Solución A:  ACIDO PERIODICO Solución al 1%

Solución B:  REACTIVO Según SCHIFF

Ambos reactivos  “listos para usar”

 

Reactivos Auxiliares:

•           Agua Purificada  (Cod. 2000140100)

•           Aceite de Inmersión (Cod. 2000130600)

•           Xileno (Cod. 2000166200)

•           Bioclear® (Aclarante uso Histológico) (Cod. 2000942700)

•           Alcohol Etílico absoluto p.a. (Cod. 2000165400)

•           Alcohol Etílico 96º p.a. (Cod. 2000937500)

•           Hematoxilina de Gill ((I) Cod. 2000937400, (II) Cod. 2000949100, (III) 2000110100))

•           Deshidratante 100° Uso Histológico (Cod. 2000948300)

•           Deshidratante 90° Uso Histológico (Cod. 2000938300)

•           Bálsamo de Canadá Sintético (Cod. 2000130300)

 

Modo de uso:

 

Procedimiento para cortes o secciones de tejidos parafinados:

  1. Desparafinar con Xileno o Sustituto del Xileno Bioclear, dos cambios de 15 minutos cada uno.
  2. Hidratar los cortes con sucesivos pasajes por alcoholes (Alcohol Etílico absoluto y Alcohol Etílico 96º) o deshidratantes (Deshidratante 10 / 9 / 8), con graduación decreciente terminando con un lavado por inmersión en Agua desmineralizada, durante 2 3 minutos. (1*)
  3. Oxidar con Solución A durante 10 minutos a temperatura ambiente.
  4. Lavar con Agua desmineralizada, 3 o 4 cambios.
  5. Realizar tinción con Solución B durante 15 minutos a temperatura ambiente.
  6. Lavar en agua corriente común durante 5 minutos.
  7. Lavar con Agua desmineralizada durante 1 minuto.
  8. Contrastar con Hematoxilina de Harris solución o Hematoxilina de Gill (II) solución, durante 30 segundos.
  9. Virar en agua corriente durante 5 minutos.
  10. Deshidratar los cortes con sucesivos pasajes por alcoholes (Alcohol Etílico 96º y Alcohol Etílico absoluto) o deshidratantes (Deshidratante 8 / 9 / 10), con graduación crecientedurante 2 3 minutos. (2*)
  11. Aclarar mediante 2 inmersiones sucesivas en  Xileno p.a. o Sustituto del Xileno Biocleary dejar las muestras aclarando durante al menos 3 minutos.
  12. Montar con Bálsamo de Canadá Sintético. 
Resultados:
 
Estructuras PAS Positivas: Magenta
Núcleos celulares: Azul
 
Notas:
 
(1*) Sucesivos pasajes, refiere a : una inmersión en Deshidratante 100° Uso Histológico o Alcohol Etílico absoluto p.a.una inmersión en Deshidratante 9 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a., una inmersión en Deshidratante 8 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a una inmersión de al menos 2 minutos en Agua desmineralizada.

(2*) Sucesivos pasajes, refiere a: una inmersión en Deshidratante 8 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a.una inmersión en Deshidratante 9 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a.una inmersión en Deshidratante 100° Uso HistológicoAlcohol Etílico absoluto p.a.

 

Procedimiento para frotis de sangre, improntas de tejidos o extendidos citológicos:

  1. Realizar los frotis o extendidos y rociar con fijador en spray Pathofix Fijador Citológico durante 5 minutos.
  2. Lavar con Agua desmineralizada y luego incubar con Solución A durante 10 minutos.
  3. Lavar nuevamente con Agua desmineralizada, 3 o 4 cambios.
  4. Incubar con Solución B durante 15 minutos a temperatura ambiente.
  5. Lavar en agua corriente común durante 5 minutos.
  6. Lavar con Agua desmineralizada durante 1 minuto.
  7. Contrastar con Hematoxilina de Harris Solución o Hematoxilina de Gill (II) Solución durante 30 segundos.
  8. Virar en agua corriente durante 5 minutos.
  9. Deshidratar con alcoholes (Alcohol Etílico 96º y Alcohol Etílico absoluto) o deshidratantes (Deshidratante 8 / 9 / 10 uso histológico) crecientes en graduación, en sucesivos pasajes (*2).
  10. Aclarar mediante 2 inmersiones sucesivas en Xileno p.a. o Sustituto del Xileno Bioclear, dejar las muestras aclarando durante al menos 3 minutos.
  11. Montar con Bálsamo de Canadá Sintético. 
Resultados:
 
Estructuras PAS Positivas: Magenta
Núcleos celulares: Azul

 

Notas:
 

(2*) Sucesivos pasajes, refiere a: una inmersión en Deshidratante 8 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a.una inmersión en Deshidratante 9 Uso Histológico o Alcohol Etílico 96º p.a.una inmersión en Deshidratante 100° Uso HistológicoAlcohol Etílico absoluto p.a.

 

Diagnóstico: 

El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.

Los diagnósticos y evaluaciones las deben realizar solo personas autorizadas y calificadas. Siempre es recomendable el uso de controles de tinción apropiados para descartar resultados erróneos.

 

Almacenamiento y estabilidad:

           Almacenar el producto en envase cerrado (sin usar), a temperatura ambiente menor de 25ºC y al abrigo de la luz.

           Para lograr una óptima estabilidad de los componentes del Kit Tinción de PAS, una vez abiertos los envases, conservar en refrigerador entre 2ºC a 8°C .

           Mantenga bien cerrados los envases y dentro de la caja contenedora.

           Utilice el producto hasta la fecha de caducidad indicada en el envase.

USOS ANALITICOS
Aplicable en cortes histológicos o en frotis de sangre y medula osea. Destinada para a la tincion de linfocitos, mucopolisacaridos y hongos. Tincion intesa y definida de color ROJO PURPURA

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