Análisis | Especificación |
Aspecto | Líquido claro e incoloro |
Densidad (15°C) | 0,8580-0,8710 |
Agua | 24,10-29,20% p/v |
DESHIDRATANTE 80°
DESHIDRATANTE 90°
DESHIDRATANTE 100°
Uso Histológico
Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro
Cat. 2000938200 / 2000938300 / 200038300
Uso previsto
Deshidratantes 80°, 90°, 100° Uso Histológico se utilizan para el procesamiento histológico de muestras de tejidos, en la etapa de deshidratación de muestras (etapa posterior a la fijación y anterior a la impregnación en parafina).
Principio
La Deshidratación en el procesamiento histológico es la etapa que comprende la extracción del agua contenida en las muestras de tejido fijado. Esta etapa del proceso debe ser gradual y completa ya que la etapa siguiente comprende el aclaramiento con solventes o sustitutos como Bioclear. Para tal fin se utilizan líquidos Deshidratantes 80º / 90º /100º de uso histológico, en los cuales se sumergen las muestras de tejido
Procedencia de muestras
Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorios.
Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.
Los manuales de procedimientos histológicos y citológicos estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección, manipulación y almacenaje de las mismas.
Reactivos y presentación
Deshidratante 100° Biopack solución (uso histológico)
Cat. 2000948308 – Botella 1000 mL
Cat. 2000948309 – Bidón 5 L
Deshidratante 90° Biopack solución (uso histológico)
Cat. 2000938308 – Botella 1000 mL
Cat. 2000938309 – Bidón 5 L
Deshidratante 80° Biopack solución (uso histológico)
Cat. 2000938208 – Botella 1000 mL
Cat. 2000938209 – Bidón 5 L
Materiales auxiliares no suministrados
- Formol 10% v/v (Tamponado pH 7) (Biopack cat. 2000170200
- Xilol o Bioclear (Biopack cat. 2000942700)
- Parafina o HISTOPLAST® SINTETICO PF 56-58ºC (Parafina Modificada en Pellets Blancos) (Biopack cat. 2000120500)
- Bálsamo de Canadá sintético (Biopack cat. 2000130300)
- Cubreobjetos
Preparacion del reactivo
DESHIDRATANTE 80º / 90º / 100° ° (Uso histológico) s un producto listo para usar
Preparación de muestras
Las muestras de tejidos a procesar deben estar fijadas en formol 10% al menos durante 24 horas.
Diagnostico
El diagnostico de muestras debe ser realizados solamente por el profesional habilitado o personal autorizado.
Deberán realizarse ensayos previos a la aplicación del producto.
Cada aplicación deberá incluir muestras de control para descartar resultados erróneos.
El microscopio usado deberá corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.
Procedimiento
1) Procesamiento de muestras de tejidos automático o manual
Paso Método/Reactivo Técnica Tiempo Observaciones
1 Fijación / Formol 10 % Inmersión 24 a 72 hs El volumen de fijador debe ser 5 veces el volumen de la muestra
2 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90° Inmersión 60 min
3 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90° Inmersión 60 min
4 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90° Inmersión 60 min
5 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100° Inmersión 60 min
6 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100° Inmersión 60 min
7 Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100° Inmersión 60 min
8 Aclarado / Bioclear Inmersión 90 min
9 Aclarado / Bioclear Inmersión 90 min
10 Impregnación / Parafina o Histoplast Inmersión 120 min
11 Impregnación / Parafina o Histoplast Inmersión 120 min
12 Impregnación / Parafina o Histoplast Inmersión 120 min
Notas técnicas
1. Se recomienda que el tamaño de las muestras de tejido ubicado en un casette estándar de proceso, no interfiera la circulación de reactivos en inmersión (tamaño de la muestra acorde al espacio del casette , ej. 2,5 x 2,5 x 0.4 cm)
2. La etapa de Deshidratación previa al aclarado en Bioclear deben ser rigurosa en cuanto a tiempos de inmersión de las muestras y renovación periódica de reactivos de cada una de las etapas.
Resultados:
• Muestras de tejidos incluidas en parafina en pequeños bloques: (almacenar en un ambiente que no supere 25°C).
• Las muestras incluidas en parafina, se realizan los cortes histológicos en micrótomo.
2) Procedimiento para equipo de tinción automático o manual:
(Ejemplo: Tincion de Hematoxilina y Eosina)
Paso Método/Reactivo Técnica Tiempo Observaciones
1 Desparafinar con Xileno / Bioclear 2 cambios 10 min
2 Hidratar con Etanol 100 / Deshidratante 100 Varias inmersiones Pasaje
3 Hidratar con Etanol 96 / Deshidratante 90 Varias inmersiones Pasaje
4 Hidratar con Etanol 96 / Deshidratante 90 Varias inmersiones Pasaje
5 Agua destilada Inmersión 3 min
6 Hematoxilina de Harris Inmersión 1 a 3 min
7 Virar en agua corriente Inmersión 3 a 5 min Hasta coloración azul de las muestras
8 Solución Diferenciadora (Virado Opcional) Inmersión rápida Pasaje Opcional
9 Agua corriente Varias Inmersiones Pasaje
10 Solución Alcalina diluida (Virado Opcional) Inmersión 2 min Opcional
11 Eosina Solución Inmersión 30 a 60 seg
12 Lavar en agua corriente Pasaje
13 Deshidratar con Alcoholes crecientes Varias inmersiones Pasaje (según Procedimiento (1))
14 Aclarar con Xilol / Bioclear 2 cambios 2 minutos
15 Montar con Bálsamo y Cubreobjetos
Notas técnicas:
• Previo al desparafinado, incubar las laminas / cortes histológicos en estufa a 60 / 65°C durante al menos 60 minutos.
• En el montaje final con Bálsamo, escurrir bien el excedente de aclarante de la lamina / preparado histológico, de manera tal que el bálsamo sea el que cubra por completo el corte histológico al deslizar el cubreobjeto sobre el mismo.
• Renueve periódicamente los deshidratantes para lograr una acción efectiva deshidratación de las muestras.
Resultados
• Preparados histológicos teñidos con Hematoxilina y Eosina, y montados con Balsamo y cubreobjetos (almacenar en ambiente que no supere los 25°C)