HISTODECAL NITRIC

Solución descalcificante de uso histológico a base de Acido Nítrico

 

Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro              

Cat. N°2000942008

 

Uso previsto:

Solución descalcificante de uso histológico a base de Acido Nítrico, recomendada para un primer paso de decalcificación de piezas óseas completas o semicompletas para luego fragmentar en piezas o tacos de menor tamaño. con rigurosidad en su aplicación ya que una sobreexposición del tejido a estos agentes puede causar pérdida de tinción nuclear, deterioro de la morfología celular o pérdida de antigenicidad.

 

Principio:

Dentro de la variedad de tejidos que se procesan para estudio histológico e histopatológico se encuentran las muestras de tejido óseo. Este tipo de tejidos contienen calcio en su composición por lo que requieren descalcificación previa, para poder luego realizar el proceso de inclusión y  su correspondiente preparación histológica.

Los descalcificantes a base de Acido Nítrico provocan una rápida decalcificación y causan baja retracción tisular. Se obtiene una mejor coloración de los núcleos durante la tinción, y no es necesario neutralizar el agente decalcificante sino que puede pasar directamente el tejido a etanol de 70º para iniciar la deshidratación. En contrapartida, la prolongación excesiva del tiempo de decalcificación suele anular la fijación previa y alterar progresivamente el tejido, causando pérdida de tinción nuclear, deterioro de la morfología celular o pérdida de antigenicidad.

 

Procedencia de muestras:

Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorios.

Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.

Los manuales de procedimientos histológicos y citológicos estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección, manipulación y  almacenaje de las mismas.

 

Reactivos y presentación:

Histodecal Nitric - Botella 1000 mL (Cat. 2000942008)

 

Preparación del reactivo:

Reactivo listo para usar. Este producto no requiere dilución y/o preparación previa.

 

Preparación de muestras:

Las muestras de tejido a decalcificar deben de estar fijadas con Formol 10 % Tamponado pH 7 Biopack, previamente durante 24 a 48 horas.

 

Diagnóstico:

El diagnostico de muestras debe ser realizados solamente por el profesional habilitado o personal autorizado.

Deberán realizarse ensayos previos a la aplicación del producto.

Cada aplicación deberá incluir muestras de control para descartar resultados erróneos.

El microscopio usado deberá corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.

 

Procedimiento:

 

Paso	Método / Reactivo	Técnica	Tiempo	Observaciones
1	Fijación / Formol 10 % buffer	Inmersión	24 a 48 horas	Ver Notas Técnicas  (*1)
2	Lavado / Agua corriente	Inmersión	10 minutos
3	Descalcificación / HISTODECAL NITRIC	Inmersión	Ver Notas Técnicas (*2)	Ver Notas Técnicas  (*1) (*3)(*4)(*5)
4	Lavado / Agua corriente	Inmersión	10 minutos
5	Deshidratación / Aclarado /  Inclusión en parafina	Inmersión	Ver Notas Técnicas (*6)

 

Notas técnicas:

(*1) - El Volumen de Fijador y de Histodecal Nitric debe ser entre 15 y 20 veces el volumen de la muestra a procesar.

(*2) - Para piezas óseas de gran tamaño, hemi-seccionar para facilitar la penetración del fijador y de la posterior solución decalcificante.

De no ser posible hemi-seccionar por su dureza, una vez fijada la pieza, enlazar la pieza con hilo de sutura o similar y en frasco de vidrio sumergir suspendida en solución de HISTODECAL NITRIC Biopack.

Controlar a las 24 horas y realizar la toma de tacos / fragmentos para continuar con el procesamiento habitual.

Lavar la pieza y/o los tacos / fragmentos en agua corriente durante 5 a 10 minutos, y preservar el material de reserva en Formol 10 % Tamponado pH 7 Biopack.

Si estos tacos / fragmentos no muestran signos de completa decalcificación, continuar con el procedimiento sumergiéndolos en solución de HISTODECAL NITRIC Biopack.

 

Nota:  Es de suma importancia contar con los datos clínicos, antecedentes y diagnóstico presuntivo del paciente a estudiar u objetivo del trabajo a realizar.

Si se tratarse de muestras de tejido óseo con sospecha de infiltración neoplásica, debe ser riguroso el tiempo de exposición a HISTODECAL NITRIC Biopack.

Un tiempo excesivo podría deteriorar la morfología celular y los determinantes antigénicos presentes en el tejido.

Una vez decalcificados los fragmentos, lavarlos para eliminar restos de solución decalcificante y proceder con el procesamiento, inclusión y corte histológico.

Cualquier tejido sometido a una decalcificación prolongada o excesiva, puede ver comprometida tanto sus características morfológicas como sus propiedades histoquímicas condicionando los resultados de posteriores tinciones que se realicen sobre los mismos.

Para el caso de Descalcificantes a base de Ácidos Fuertes (Acido Nítrico, Acido Clorhídrico)  y/o Débiles (Acido Fórmico), si es notorio que el punto final de la descalcificación está cerca o por una cuestión de finalización de la jornada laboral o días no laborables; retirar las muestras del descalcificador, enjuagar con agua corriente y volver a colocar en fijador Formol 10% Buffer, y retomar con el proceso más tarde. Otra alternativa es refrigerar la muestra a 4°C en su descalcificador para ralentizar el proceso.

 

(*3) - La renovación periódica de la solución descalcificante durante el proceso de descalcificación, promueve la penetración uniforme y efectiva del reactivo y disminuye el tiempo final de descalcificación de la muestra.

(*4) - Evite una descalcificación prolongada o excesiva de las muestras óseas.

(*5) - Es importante determinar el punto final de descalcificación. La acción excesiva de descalcificantes a base de acido fuerte, pueden causar maceración de los componentes tisulares más blandos, además de perjudicar la correcta tinción de elementos basófilos (núcleos celulares).

En contraposición las muestras que no estén completamente decalcificadas pueden ser imposibles de cortar y obtener una preparación histológica adecuada.

El método más efectivo para determinar la finalización de la descalcificación, particularmente con muestras grandes como cabezas femorales, es radiografiar la muestra y evaluar las imágenes. También pueden aplicarse maniobras de manipulación como doblar, palpar, recortar o pinchar con una aguja la muestra para "verificar" las áreas calcificadas restantes. Este método puede tener éxito si lo realiza personal con amplia experiencia, pero se lo considera poco confiable.

Las muestras podrían sufrir roturas criticas (por ejemplo de médula ósea) realizando dichas maniobras, y se pueden pasar por alto pequeños depósitos de calcio.

(*6) - Proceder con la deshidratación progresiva, el aclarado y la inclusión en parafina, según procedimientos de rutina.

 

Resultados:

Obtención de muestras de tejido óseo listas para proceso de deshidratación, aclarado e inclusión en parafina.

 

Precauciones:

Se deben seguir las precauciones habituales ejercidas en el manejo de reactivos de laboratorio.

Referirse a la Hoja de Seguridad del producto para obtener información sobre riesgo, peligro o medidas de seguridad.

Solamente para uso profesional: 

El uso y aplicación de este tipo de reactivos debe ser realizado por personal especializado.

El usuario deberá cumplir las directivas locales sobre seguridad en el trabajo y aseguramiento de la calidad.

Protección contra infecciones:

El profesional a cargo del uso o aplicación deberá contar con equipamiento de protección eficaz contra infecciones de acuerdo con las directivas de trabajo establecidas en laboratorios asistenciales o de investigación.

 

Indicaciones para la eliminación de residuos:

Las soluciones usadas y las soluciones caducas deben eliminarse como desecho peligroso, cumpliendo con las regulaciones locales, estatales, provinciales o nacionales acerca del manejo de este tipo de residuos.

El envase del producto debe ser eliminado de acuerdo con las directivas vigentes de eliminación de residuos.

Clasificación de sustancias peligrosas:

Tener en cuenta la clasificación de sustancias peligrosas en la etiqueta y las indicaciones en la ficha de datos de seguridad.

Ficha de seguridad del producto:  https://www.biopack.com.ar/ficha-msds_867_histodecal-nitric

 

Estabilidad y almacenamiento:

Almacenar el reactivo a temperatura ambiente (entre 15°C a 30°C) y protegido de la luz.

La solución es estable hasta la fecha de vencimiento que se declara en la etiqueta.

 

Información para el consumidor:

El producto está garantizado por el fabricante hasta su fecha de vencimiento si se lo transporta y almacena en las condiciones prescriptas. Ante cualquier consulta, el fabricante puede ser contactado personalmente, por email o por teléfono o ingresando en  www.biopack.com.ar   solapa de contacto

 

Referencias:

1.            Theory and Practice of Histotechnology (2nd Edition): Dezna Sheehan, Barbara Hrapchak, Battle Press/Columbus Richland

2.            Theory and Practice of Histological Techniques, John D Bancroft and Marilyn Gamble, 6th Edition

3.            Biopsia de la médula ósea Perspectiva clínico-patológica ,2.ª edición. Director: Luis Hernández Nieto

3.            “Laboratorio de Anatomía Patológica”, autor: Raimundo García del Moral .

4.            “Laboratory methods in histotechnology”, Armed Forces Institute of Pathology (U.S.)

 

Establecimiento elaborador:

 

Sistemas Analíticos S.A.

Ruta N°9 Km. 105,5 Colectora Oeste, Lima, pdo. Zárate, pcia. Buenos Aires, Argentina.

Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro.

Uso profesional exclusivo.