HISTODECAL EXTRA

Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro                               

Cat. N°2000942108

Uso previsto:

Solución descalcificante de uso histológico, de acción quelante a base de EDTA con pH 7, y libre  de ácidos fuertes u orgánicos. Aplicación general para piezas de tejido óseo completas, semicompletas o biopsias que requieran máxima preservación de detalles celulares y adecuada preservación de determinantes antigénicos.

Principio:

Dentro de la variedad de tejidos que se procesan para estudio histológico e histopatológico se encuentran las muestras de tejido óseo. Este tipo de tejidos contienen calcio en su composición por lo que requieren descalcificación previa, para poder luego realizar el proceso de inclusión y  su correspondiente preparación histológica.

Los agentes quelantes como el ácido etilendiaminotetracético (EDTA) actúan capturando los iones de calcio de la superficie ósea, formando luego compuestos solubles en agua. Este proceso es efectivo, pero de progresión lenta dependiendo del tamaño y tipo de muestra a decalcificar. Es el descalcificante más apropiado cuando se requiere una morfología de muy alta calidad o elementos moleculares conservados para técnicas como IHQ, FISH o PCR.

En el ámbito asistencial su aplicación predominante es en la descalcificación de biopsias de médula ósea.

Procedencia de muestras:

Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorios.

Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.

Los manuales de procedimientos histológicos y citológicos estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección, manipulación y  almacenaje de las mismas.

Reactivos y presentación:

Histodecal Extra - Botella 1000 mL (Cat. 2000942108)

Preparación del reactivo:

Reactivo listo para usar. Este producto no requiere dilución y/o preparación previa.

Preparación de muestras:

Fijación:  Las muestras de tejido a decalcificar deben de estar fijadas con Formol 10% Buffer previamente. De ser una pieza de gran tamaño, se recomienda seleccionar y recortar en  fragmentos de menor tamaño para lograr una óptima penetración, ya sea del fijador como del descalcificante.

Diagnóstico:

El diagnostico de muestras debe ser realizados solamente por el profesional habilitado o personal autorizado.

Deberán realizarse ensayos previos a la aplicación del producto.

Cada aplicación deberá incluir muestras de control para descartar resultados erróneos.

El microscopio usado deberá corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.

Procedimiento:

Notas técnicas:

(*1) - El Volumen de Fijador y de Histodecal Extra debe ser entre 15 y 20 veces el volumen de la muestra a procesar.

(*2) - El tiempo estimado para decalcificar una muestra ósea de 3,0 x 0,5 x 0,5 cm (biopsia de médula ósea) es de 12 a 15 horas (inclusive podría ser menos tiempo dependiendo de la proporción de trabeculado óseo y la existencia de hueso compacto).

Las muestras podrían permanecer en Histodecal Extra durante la noche, si la descalcificación no se completo durante la jornada de trabajo. Por su acción de quelante químico no produce degradación o alteraciones en la morfología histológica.

Para el caso de Descalcificantes a base de Ácidos Fuertes (Acido Nítrico, Acido Clorhídrico)  y/o Débiles (Acido Fórmico), si es notorio que el punto final de la descalcificación está cerca o por una cuestión de finalización de la jornada laboral o días no laborables; retirar las muestras del descalcificador, enjuagar con agua corriente y volver a colocar en fijador Formol 10% Buffer, y retomar con el proceso más tarde. Otra alternativa es refrigerar la muestra a 4°C en su descalcificador para ralentizar el proceso.

(*3) - La renovación periódica de la solución descalcificante durante el proceso de descalcificación, promueve la penetración uniforme y efectiva del reactivo y disminuye el tiempo final de descalcificación de la muestra.

(*4) - Evite una descalcificación prolongada o excesiva de las muestras óseas.

(*5) - Es importante determinar el punto final de descalcificación. La acción excesiva de descalcificantes a base de acido fuerte, pueden causar maceración de los componentes tisulares más blandos, además de perjudicar la correcta tinción de elementos basófilos (núcleos celulares).

En contraposición las muestras que no estén completamente decalcificadas pueden ser imposibles de cortar y obtener una preparación histológica adecuada.

El método más efectivo para determinar la finalización de la descalcificación, particularmente con muestras grandes como cabezas femorales, es radiografiar la muestra y evaluar las imágenes. También pueden aplicarse maniobras de manipulación como doblar, palpar, recortar o pinchar con una aguja la muestra para "verificar" las áreas calcificadas restantes. Este método puede tener éxito si lo realiza personal con amplia experiencia, pero se lo considera poco confiable.

Las muestras podrían sufrir roturas criticas (por ejemplo de médula ósea) realizando dichas maniobras, y se pueden pasar por alto pequeños depósitos de calcio.

(*6) - Proceder con la deshidratación progresiva, el aclarado y la inclusión en parafina, según procedimientos de rutina.

Resultados:

Obtención de muestras de tejido óseo listas para proceso de deshidratación, aclarado e inclusión en parafina.

Precauciones:

Se deben seguir las precauciones habituales ejercidas en el manejo de reactivos de laboratorio.

Referirse a la Hoja de Seguridad del producto para obtener información sobre riesgo, peligro o medidas de seguridad.

Solamente para uso profesional: 

El uso y aplicación de este tipo de reactivos debe ser realizado por personal especializado.

El usuario deberá cumplir las directivas locales sobre seguridad en el trabajo y aseguramiento de la calidad.

Protección contra infecciones:

El profe