DESHIDRATANTE  80°

DESHIDRATANTE  90°

DESHIDRATANTE  100°

Uso Histológico

 

Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro       

Cat. 2000938200 / 2000938300 / 200038300

 

Uso previsto

Deshidratantes 80°, 90°, 100° Uso Histológico se utilizan para el procesamiento histológico de muestras de tejidos, en la etapa  de deshidratación de muestras (etapa posterior a la fijación y anterior a la impregnación en parafina).

 

Principio

La Deshidratación en el procesamiento histológico es la etapa que comprende la extracción del agua contenida en las muestras de tejido fijado. Esta etapa del proceso debe ser gradual y completa ya que la etapa siguiente comprende el aclaramiento con solventes o sustitutos como Bioclear. Para tal fin se utilizan líquidos Deshidratantes 80º / 90º /100º de uso histológico, en los cuales se sumergen las muestras de tejido

 

Procedencia de muestras

Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorios.

Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.

Los manuales de procedimientos histológicos y citológicos estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección, manipulación y  almacenaje de las mismas.

 

Reactivos y presentación

Deshidratante 100° Biopack solución (uso histológico)

Cat. 2000948308 – Botella  1000 mL

Cat. 2000948309 – Bidón  5 L

 

Deshidratante 90° Biopack solución (uso histológico)

Cat. 2000938308 – Botella  1000 mL

Cat. 2000938309 – Bidón  5 L

 

Deshidratante 80° Biopack solución (uso histológico)

Cat. 2000938208 – Botella  1000 mL

Cat. 2000938209 – Bidón  5 L

 

Materiales auxiliares no suministrados

-           Formol 10% v/v (Tamponado pH 7) (Biopack cat. 2000170200

-           Xilol o Bioclear  (Biopack cat. 2000942700)

-           Parafina o HISTOPLAST® SINTETICO PF 56-58ºC (Parafina Modificada en Pellets Blancos) (Biopack cat. 2000120500)

-           Bálsamo de Canadá sintético (Biopack cat. 2000130300)

-           Cubreobjetos

 

Preparacion del reactivo

DESHIDRATANTE 80º / 90º / 100° ° (Uso histológico) s un producto listo para usar

 

Preparación de muestras

Las muestras de tejidos a procesar deben estar fijadas en formol 10% al menos durante 24 horas.

 

Diagnostico

El diagnostico de muestras debe ser realizados solamente por el profesional habilitado o personal autorizado.

Deberán realizarse ensayos previos a la aplicación del producto.

Cada aplicación deberá incluir muestras de control para descartar resultados erróneos.

El microscopio usado deberá corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.

 

Procedimiento

1)         Procesamiento de muestras de tejidos automático o manual

 

Paso    Método/Reactivo                                                            Técnica             Tiempo             Observaciones

1          Fijación / Formol 10 %                                                    Inmersión         24 a 72 hs        El volumen de fijador debe ser 5 veces el volumen de la muestra

2          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90°           Inmersión         60 min 

3          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90°           Inmersión         60 min 

4          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 90°           Inmersión         60 min 

5          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100°         Inmersión         60 min 

6          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100°         Inmersión         60 min 

7          Deshidratación / Alcohol 96 o Deshidratante 100°         Inmersión         60 min 

8          Aclarado / Bioclear                                                         Inmersión          90 min 

9          Aclarado / Bioclear                                                         Inmersión          90 min 

10        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 min           

11        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 min           

12        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 min           

 

 Notas técnicas

1.         Se recomienda que el tamaño de las muestras de tejido ubicado en un casette estándar de proceso, no interfiera la circulación de reactivos en inmersión (tamaño de la muestra acorde al espacio del casette , ej. 2,5 x 2,5 x 0.4 cm)

2.         La etapa de Deshidratación previa al aclarado en Bioclear deben ser rigurosa en cuanto a tiempos de inmersión de las muestras y renovación periódica de reactivos de cada una de las etapas.

 

Resultados:

•           Muestras de tejidos incluidas en parafina en pequeños bloques: (almacenar en un ambiente que no supere 25°C).

•           Las muestras incluidas en parafina, se realizan los cortes histológicos en micrótomo.

 

2)         Procedimiento para equipo de tinción automático o manual:

           (Ejemplo: Tincion de Hematoxilina y Eosina)

 

Paso    Método/Reactivo                                                 Técnica                         Tiempo             Observaciones

1          Desparafinar con  Xileno / Bioclear                    2 cambios                    10 min 

2          Hidratar con Etanol 100 / Deshidratante 100      Varias inmersiones       Pasaje 

3          Hidratar con Etanol 96 / Deshidratante 90          Varias inmersiones       Pasaje 

4          Hidratar con Etanol 96 / Deshidratante 90          Varias inmersiones       Pasaje 

5          Agua destilada                                                     Inmersión                     3 min   

6          Hematoxilina de Harris                                       Inmersión                     1 a 3 min         

7          Virar  en agua corriente                                       Inmersión                     3 a 5 min          Hasta coloración azul de las muestras

8          Solución Diferenciadora  (Virado Opcional)       Inmersión rápida           Pasaje              Opcional

9          Agua corriente                                                     Varias Inmersiones       Pasaje 

10        Solución Alcalina diluida (Virado Opcional)       Inmersión                     2 min                Opcional

11        Eosina Solución                                                    Inmersión                     30 a 60 seg     

12        Lavar en agua corriente                                        Pasaje 

13        Deshidratar con Alcoholes crecientes                  Varias inmersiones       Pasaje  (según Procedimiento (1))

14        Aclarar con Xilol / Bioclear                                  2 cambios        2 minutos        

15        Montar con Bálsamo y Cubreobjetos                           

 

Notas técnicas:

•           Previo al desparafinado, incubar las laminas / cortes histológicos en estufa a 60 / 65°C durante al menos 60 minutos.

•           En el montaje final con Bálsamo, escurrir bien el excedente de aclarante de la lamina / preparado histológico, de manera tal que el bálsamo sea el que cubra por completo el corte histológico al deslizar el cubreobjeto sobre el mismo.