PATHOCLEAR PLUS

 

Aclarante alifático de uso histológico

Reactivo de Diagnóstico de Uso in Vitro                               

Cat. N°  2000953800

 

Uso previsto:

Pathoclear Plus (Aclarante alifático de uso histológico), se utiliza en la etapa denominada de “Aclarado” de las muestras de tejido, dentro del procesamiento histológico. También aplica para el desparafinado de cortes histológicos, previo a su tinción.

Es un aclarante sustituto de solventes como el Xilol.

Es un producto libre de regulaciones  y/o restricciones de adquisición y uso.

 

Principio:

El procesamiento de muestras de tejido tiene como objetivo impregnar la totalidad de la muestra en un medio solido, firme y suave que le de soporte y rigidez al tejido para su posterior corte, tinción y observación al microscopio.

Este proceso de impregnación / inclusión se cumple en 4 etapas:

1.         Fijación

2.         Deshidratación

3.         Aclarado

4.         Impregnación / Inclusión

Pathoclear Plus se aplica como alternativa al uso de Xilol o cualquier otro solvente aromático, en la etapa de “Aclarado” de las muestras.

Su aplicación es una opción para evitar el uso de Xilol que es altamente toxico para el personal que opera a diario en el ambiente del laboratorio.

Pathoclear plus es un solvente alifático incoloro e inodoro

Tiene la cualidad de ser miscible tanto en el agente deshidratante (alcoholes deshidratantes)  como en el medio de inclusión (Parafinas), al igual que el Xilol.

Pathoclear Plus por su condición de Solvente No Aromático,  no produce emisión de vapores nocivos para la salud del usuario.

 

Procedencia de muestras:

Se recomienda que la recolección de muestras se realice de acuerdo con las guías y estándares locales de procedimientos de laboratorio.

Todos los derivados sanguíneos o de muestras de tejidos deben considerarse potencialmente infecciosos.

Los manuales de procedimientos histológicos y citológicos estándar proporcionan todos los detalles necesarios para la recolección, manipulación y  almacenaje de las mismas.

 

Reactivos y presentación:

Cat. 2000953808 – Botella 1000 mL

Cat. 2000953809 – Bidón 5 L

 

Materiales auxiliares no suministrados:

-           Formol 10% v/v (Tamponado pH 7) Biopack (Cat. N° 2000170200)

-           Deshidratante 90° Biopack (Cat. 2000938308)

-           Deshidratante 100° Biopack (Cat. 2000948308)

-           Histoplast Wax o Sintético p.f. 56-58°C (Parafina modificada en pellets blancos) (Cat. 2000120100 – 2000120500)

-           Bálsamo de Canadá sintético Biopack (Cat. N° 2000130300)

 

Preparación del reactivo:

Este producto no requiere dilución y/o preparación previa. Reactivo listo para usar

 

Preparación de muestras:

Una vez obtenidas las muestras de tejido deben ser inmediatamente sumergidas en Formol 10% o Formol 10% tamponado pH 7, de requerir estudios histológicos moleculares o de Inmunohistoquìmica.

La fijación debe ser de al menos 24 horas, dependiendo del tamaño y tipo de muestra, previo a comenzar el procesamiento.

 

Diagnostico:

El diagnostico de muestras debe ser realizados solamente por el profesional habilitado o personal autorizado.

Deberán realizarse ensayos previos a la aplicación del producto.

Cada aplicación deberá incluir muestras de control para descartar resultados erróneos.

El microscopio usado deberá corresponder a los requisitos de un laboratorio de diagnóstico médico.

 

Procedimiento:

1)         Procesamiento de muestras de tejidos automático o manual

 

Paso    Método/Reactivo                                                         Técnica             Tiempo             Observaciones

1          Fijación / Formol 1 0%                                                 Inmersión         24 a 72 horas    El volumen de  fijador debe ser 5 veces el volumen de la muestra

2          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 90°          Inmersión         60 minutos      

3          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 90°          Inmersión         60 minutos      

4          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 90°          Inmersión         60 minutos      

5          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 100°        Inmersión         60 minutos      

6          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 100°        Inmersión         60 minutos      

7          Deshidratación / Alcohol 96º o Deshidratante 100°        Inmersión         60 minutos      

8          Aclarado / Pathoclear Plus                                           Inmersión         90 minutos      

9          Aclarado / Pathoclear Plus                                           Inmersión         90 minutos      

10        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 minutos     

11        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 minutos     

12        Impregnación / Parafina o Histoplast                             Inmersión         120 minutos     

 

Notas técnicas:

1.         Se recomienda que el tamaño de las muestras de tejido ubicado en un casette estándar de proceso, no interfiera la circulación de reactivos en inmersión (tamaño de la muestra acorde al espacio del casette, ej. 2,5 x 2,5 x 0,4 cm)

2.         La etapa de deshidratación previa al aclarado con Pathoclear Plus debe ser rigurosa en cuanto a tiempos de inmersión de las muestras y renovación periódica de reactivos de cada una de las etapas.

3.         Renueve periódicamente el aclarante Pathoclear Plus para lograr una acción efectiva en el aclarado de las muestras.

4.         En caso de procesar muestras con gran concentración de tejido adiposo es conveniente prolongar la estación de aclarado con Pathoclear Plus o sumar un paso de aclarado con Bioclear (Biopack Cat. 2000942700)

 

2)         Procedimiento para equipo de tinción automático o manual

(ejemplo: Tinción de Hematoxilina y Eosina)

 

Paso    Método/Reactivo                                                         Técnica                         Tiempo             Observaciones

1          Desparafinar / Pathoclear Plus                                     2 cambios                    15 min.

2          Hidratar con Etanol 100º / Deshidratante 100º                Varias inmersiones       Pasaje 

3          Hidratar con Etanol 96º / Deshidratante 90º                   Varias inmersiones       Pasaje 

4          Hidratar con Etanol 96º / Deshidratante 90º                   Varias inmersiones       Pasaje 

5          Agua destilada                                                            Inmersión                     3 min.  

6          Hematoxilina de Harris                                                 Inmersión                     1 a 3 min.        

7          Virar  en agua corriente                                                Inmersión                     3 a 5 min          Hasta coloración azul de las muestras

8          Solución Diferenciadora  (Virado Opcional)                   Inmersión rápida           Pasaje              Opcional

9          Agua corriente                                                             Varias Inmersiones       Pasaje 

10        Solución Alcalina diluida (Virado Opcional)                   Inmersión                     2 min.               Opcional

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